香樟,古称“豫章”,为樟科樟属亚热带常绿阔叶乔木。香樟材质优良,纹理雅致,香气浓郁,不仅是提取纯天然香料的重要原料,也是城市绿化、园林景观的良好树种。据报道,现在提取樟树香料已由过去砍伐大树提取,改为密植矮林、割取树叶提取的方式。但香樟采用扦插、嫁接等无性繁殖扩繁较困难,且母株材料来源有限,无法满足规模生产的需要;种子繁殖则实生苗后代分离严重,多数劣变,且育苗时发芽迟缓,苗木参差不齐。而采用离体培养不仅能实现工厂化生产优良香樟,而且能够保持母本的优良特性。目前,国内对香樟的组织培养已经进行了不少探索,并取得了一定的成效。为了更好地推进香樟的生产发展,本文就近年来香樟的组培快繁技术的研究进展作一综述。
无菌外植体的选择
目前,用于香樟组织培养的外植体主要是幼叶、嫩茎、茎段、嫩芽和未成熟的幼胚。如王长宪等认为,由于香樟内生菌较重,因而采用多菌灵溶液对3年生的香樟树枝条进行催芽培养,结果表明:培养1周后多数枝条开始萌芽,2周后新芽长到0.5一2.5cm;而吴幼媚等则以当年萌发的嫩枝为外植体,研究发现,2月份无菌活体的获取率最高,达60%;其次是3月,获取率为46%;而气温较高的6一9月,无菌活体获取率最低。
培养基配方选用
基本培养基
在香樟组织培养过程中通常使用的基本培养基是MS、改良MS、1/2MS,按培养目的的不同进行调整。吴金寿等认为,以改良Ms为基本培养基的组合,其诱导系数最高,苗况较好未见褐变;而以MS为基本培养基的组合有褐变死亡现象:以1/2MS为基本培养基的组合诱导系数最低,且茎叶变为枣红色。辜夕容等研究表明,全量Ms大量元素的培养基为最适芽生长培养基,含半量MS大量元素的培养基最适于香樟茎段的愈伤组织生长。索长江等研究认为,Ms加50一100mg/L的NaH2P04可提高丛生芽的质量,降低断茎和叶褐死现象,同时高NH4+和NO3一是必需的。在MS培养基中加人Ca(NO3)2,一方面可以给苗木提供更多的ca2+,同时N03一能促进植物对K+、ca2+、Mg2十等阳离子的吸收;另一方面避免了初始芽的褐化。
外源激素
2.2.1外植体的诱导香樟外植体诱导过程中施加的细胞分裂素一般选用6-BA,生长素一般选用NAA和IAA。吴金寿等研究表明,芳樟茎段用改良MS+6-BA2mg/L+NAA0.lmg/L固体培养基,诱导系数最高,培养巧d后陆续分化出不定芽,苗况较好未见褐变。王长宪等研究发现,香樟侧芽的分化受NAA的影响较大,在加人一定量的6-BA情况下,再加人0.lmg/LNAA对侧芽诱导初分化效果明显;在对香樟叶片愈伤组织诱导时,附加BA和2,4一D的配比为1:4能提高愈伤组织的诱导率。辜夕容等则认为,6-BA浓度越高,对香樟茎段上隐芽的萌动与伸长越有利,低浓度6-BA有利于愈伤组织的生长;培养基中NAA浓度越高,香樟茎段上愈伤组织长得越好,但过低或过高则不利于香樟茎段隐芽的萌动与伸长,而在浓度适中(0.05mg/L)时,腋芽才长得最好;同时6-BA与NAA的浓度比过低或过高均不利于香樟茎段隐芽的萌动与伸长,只有在6一BA/NAA为40时,萌出的腋芽最长,较低配比则有利于促进愈伤组织的形成。因此认为MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.O5mg/L为香樟茎段初代培养的最适培养基,而l/2MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.lmg/L可用于产生愈伤组织。吴幼媚等则认为6-BA4一5mg/L十IAA2mg/L是香樟丛生芽诱导的理想激素组合。
(第一苗木站 香樟种植管理技术专题)